วิธีการทำสไลด์

2. มาเลี้ยงด้วยตับผสมสีคาร์มีน โดยเลี้ยงประมาณ 3 วัน (ต้องเปลี่ยนอาหาร และน้ำ ทุกวัน ตับควรเป็นตับใหม่ๆ เมื่อครบ 3 วัน เช็คสีว่าติดที่ลำไส้ทั่วหรือยัง ด้วยกล้องสเตอริโอ ถ้าสีแดงติดทั่วแล้วก็ให้อดอาหารได้) จะให้อดอาหาร 1 วัน (ตามหลักการให้อดอาหาร 3วัน แต่ทำจริงแล้วพบว่าสีจะจางลงจนมองไม่เห็น จึงให้อดอาหารเพียง 1 วันเท่านั้น)

3. นำพลานาเรียมาใส่ภาชนะตื้นๆ เช่นกระจกนาฬิกา หรือทำบนแผ่นสไลด์ที่มีน้ำเล็กน้อย แล้วทำการสลบพลานาเรีย ด้วย 2% เอเควียสกรดไนตริค (aqueous nitric acid) โดยหยดตรงที่ตัวพลานาเรีย แล้วตามด้วย น้ำยาดองบูแองส์

4. ย้าย พลานาเรีย ลงดองในน้ำยาดอง บูแองส์ ประมาณ 15 นาที

5. ผ่านพลานาเรียใน 70% แอลกอฮอล์ ผสม LiCO₃ อิ่มตัว 1-2 หยด(เปลี่ยน 70% แอลกอฮอล์ หลายๆ ครั้ง จนกว่าจะหมดสีเหลืองของพิคริกใน บูแองส์ ซึ่งจะเห็นว่า 70% แอลกอฮอล์ จะใส) ใช้เวลาไม่แน่นอน ให้สังเกตสีของแอลกอฮอล์

6. ผ่าน 70% 95% 100%แอลกอฮอล์ 2ครั้งๆละประมาณ 5 นาที

7. ผ่าน 100% แอลกอฮอล์ผสมไซลีนอัตราส่วน 1: 1 นาน 5 นาที

10. ผ่าน ไซลีน 2 ครั้งๆละ 10 นาที

11. เมาต์ด้วยเปอร์เมาต์ แล้วปิดคัพเวอร์กลาส จากนั้นวางบนสไลด์วอมเมอร์

12. ทำความสะอาดสไลด์ และติดเลเบล

หมายเหตุ ถ้าหากตัวพลานาเรียงอโค้งช่วงที่ปิดคัพเวอร์กลาส ระวังจะหัก ควรค่อยๆ ปิด และให้ตัวเปอร์เมาต์ เป็นตัวช่วยให้อ่อนตัว ค่อยๆ ทำช้าๆ วิธีนี้จะได้พลานาเรียที่ตัวใสๆ แต่เห็นทางเดิน อาหารมีสีแดงข้างใน

1. สลบตัวอย่างพลานาเรีย ด้วย 2% เอเควียสกรดไนตริค โดยหยดตรงตัวพลานาเรีย แล้วตามด้วยหยดน้ำยาดอง บูแองส์

2. ย้ายพลานาเรีย ลงดองในน้ำยาดอง บูแองส์ ประมาณ 15 นาที

3. ผ่านพลานาเรีย ใน 70% แอลกอฮอล์ ผสม LiCO₃ อิ่มตัว 1-2 หยด (หลายๆ ครั้งเช็คดูจนเห็นว่า ไม่มีสีเหลืองของพิคริกใน 70 % แอลกอฮอล์อีกแล้ว)

4. ผ่าน พลานาเรีย ใน 70% แอลกอฮอล์ 2ครั้งๆละ 5 นาที

5. ย้อมด้วยสี เซมิคอนอะซิติคคาร์มีน(Semichon’s Acetic Carmine) เวลาประมาณ 10 นาที

6. ล้างสีส่วนเกินออกด้วย 70% แอลกอฮอล์ เช็คสีด้วยกล้องจุลทรรศน์ ให้มีสี ชมพูอ่อน (light pink)

7. ถ้าสีเข้มเกินไป ล้างด้วยแอซิด แอลกอฮอล์ (0.1-0. 5% กรดไฮโดรคลอริค ใน 70% แอลกอฮอล์) เวลาที่ใช้ขึ้นกับสีที่ต้องการ

8. ผ่าน พลานาเรีย ใน 70% 80% 95% แอลกอฮอล์ เวลาประมาณ 10 นาที

9..ย้อมสีซ้ำ ด้วย 0.02% ฟาสกรีนที่ละลายใน 95 % แอลกอฮอล์ นาน 20 วินาที (ถ้าเข้มข้นมากเกินไป เจือจางด้วย 95% แอลกอฮอล์) สีเขียวจะเกาะตามผิวของ พลานาเรีย

10. ผ่าน พลานาเรีย ใน 95% 100% แอลกอฮอล์ 2 ครั้งๆละ 5 นาที

11. ผ่าน พลานาเรีย ใน 100% แอลกอฮอล์ ผสมไซลีน ในอัตราส่วน 1:1 เวลาประมาณ 5 นาที ต้องมีขั้นตอนนี้เพราะเป็นการค่อยๆเพิ่มไซลีน ถ้าใส่ในไซลีนล้วนๆทันที พลานาเรีย อาจจะบิดงอเมาต์ยาก

12. ผ่าน พลานาเรีย ใน ไซลีน 2 ครั้งๆละ 5 นาที

13. เมาต์ด้วยเปอร์เมาต์ ปิดคัพเวอร์กลาส แล้ววางบนสไลด์วอมเมอร์

-น้ำกลั่น 50 มล.

-คาร์มีน 5 กรัม

การผสม ค่อยๆเติมกรดอะซีติคลงในน้ำกลั่น แล้วเติมผงคาร์มีนให้ความร้อนจนถึง

อุณหภูมิ 95⁰C-100⁰C นาน 15 นาที ทิ้งไว้ให้เย็นแล้วกรองด้วยกระดาษกรอง เป็นสต็อก โซลูชั่น(Stock solution)